Cómo ajustar un inóculo de E. coli a quinientas mil CFU / ml manualmente

En general, se encuentra que un OD 600 de 1.0 da 10 ^ 9 CFU / ml de E. coli en medio LB rico en nutrientes. Pero sugiero que haga una curva de crecimiento usando el espectrofotómetro y el método de caída de placa para contar CFU / mL en la OD600 correspondiente para correlacionarlos. Guárdelos en sus registros para futuras referencias. Cada cepa de E.coli puede diferir un poco.

Solo necesitas diluir tu suspensión funcional. ¿Tiene una suspensión de E.coli que ya sabe cuántas ufc / ml tiene? Si no lo hace, debe preparar una suspensión de una colonia (o cualquier otra cosa que tenga) y controlar la cantidad de bacterias que tiene allí, ya sea con un espectrofotómetro o mediante ensayos con placas. Una vez que lo sabes, solo necesitas diluirlo en consecuencia. También puedes cultivar E.coli en medio líquido, puede ser más fácil dependiendo de la aplicación.

Una DO de 1 a 600 nm en un medio transparente será aproximadamente 1X10 ^ 8 CFU / mL. Por lo tanto, necesita una dilución de 1 × 10 ^ 8/5 × 10 ^ 5 o una dilución de = 200.