¿Dónde puedo aprender cada paso de la expresión de proteínas en E. coli?

Por lo general, solo pregunto a las personas que lo hacen. Cada proteína es diferente y viene con su propio conjunto de desafíos, ¡así que múltiples puntos de vista ayudan!

Pero un buen recurso (aunque un poco anticuado) que realmente rompe el proceso de principio a fin es:
Clonación, expresión génica y purificación de proteínas

Si terminas necesitando expresar la proteína en células de insectos o mamíferos, este libro es un buen comienzo:
Producción de proteínas recombinantes: nuevos sistemas de expresión microbianos y eucarióticos

Creo que los libros están a la venta desde Amazon.

¡En el laboratorio!

Si quiere saber algo que funcione en el laboratorio, aprenda en el laboratorio intentándolo. De lo contrario, no lo has aprendido en absoluto.

Sin embargo, desea una breve descripción de los aspectos teóricos de la expresión de la proteína que puede seguir con estos recursos.

  1. Expresión proteica
  2. Consulte la clonación molecular de Sambrook (los 3 volúmenes)
  3. Métodos en biología molecular (según sea necesario)
  4. Protocolos de purificación de proteínas por Paul Cutler

Siempre puede buscar en línea y aprender sobre los conceptos básicos de la expresión de proteínas. Habrá mucha redundancia en todos los materiales ya que la expresión proteica en principio es muy simple. Sin embargo, en la práctica es extremadamente difícil y el nivel de dificultad depende de la proteína en uso.

¡Espero eso ayude!

Una vez que haya aprendido sobre el proceso de expresión de proteínas en E.Coli, también puede usar una herramienta para predecir la tasa de inicio de la traducción y la expresión de proteínas. Esta herramienta se llama calculadora RBS y está integrada dentro de Genome Compiler Corporation, un software de diseño de ADN todo en uno. Lea más sobre la herramienta Calculadora RBS aquí: Calculadora RBS en el compilador de genoma. ¡Buena suerte!

Encontré una guía técnica comercial de la Guía de referencia técnica para la expresión de proteínas recombinantes en E. coli, que creo que presenta muchos puntos de interés para los procedimientos de la industria. Dado que ofrece soluciones relacionadas, creo que podría ser adecuado para usted. Avísame si quieres saber más. ¡Espero eso ayude!