El método de KOH sin tinción es definitivamente la manera más rápida de confirmar una tinción de Gram, pero a veces es difícil confirmar los resultados de esta prueba.
Puede usar una prueba de sensibilidad a vancomicina . La vancomicina es un antibiótico que solo afecta la síntesis de la pared celular en bacterias Gram-positivas, inhibiendo el crecimiento de este grupo específico de microorganismos.
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El método KOH se usa para confirmar el carácter Gram de cualquier bacteria.
Una gota del 3% de la solución de KOH se toma en una diapositiva. Mezcle un asa de la bacteria de prueba con KOH en la diapositiva. Si la suspensión se gelifica o se vuelve viscosa o fibrosa, entonces la bacteria es Gram negativa .
Si no, entonces es Gram positivo.
Aquí hay algunas referencias: Fluharty y Packard, 1967.
Buck, 1982.
Lin, 1980.
La tinción de Gram debería decírtelo.
Si desea saber exactamente qué es la bacteria, ¿por qué no solo la PCR de la región 16S con iniciadores generales y la secuencia de Sanger para identificar las bacterias (en la mayoría de los casos)?
En la misma diapositiva, coloque su muestra y unas muestras Gram-positivas y Gram-negativas bien conocidas para que funcionen como controles. Si los controles funcionan, puede estar seguro de que su técnica de tinción es correcta.
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