¿Cómo puedo cultivar E. coli de mis heces?

Quiero agregar un punto rápido a las otras respuestas a este hilo. La mayoría de los e.coli utilizados en la investigación de laboratorio han cambiado enormemente desde que se aislaron por primera vez del intestino humano. Innumerables generaciones cultivadas en laboratorio, así como esfuerzos conscientes repetidos para mejorar las propiedades de las bacterias con fines de investigación, han hecho que lab strain e.coli sea una bestia completamente diferente de lo que está creciendo en su vientre, al igual que un chihuahua es muy diferente de un lobo Si desea utilizar e.coli para la biología molecular, es probable que desee una cepa de laboratorio. Si quieres estudiar tu propio microbioma, fantástico. ¡Pero no te olvides de todas las otras bacterias interesantes allí además del e.coli!

También preguntaría, ¿cuál es el propósito de hacer esto? ¿Es esto para estudiar uno de sus intestinos E. coli o para responder a otra pregunta que necesita relacionarse con otros, como las características específicas de E. coli?

En el primer caso, puede hacer lo que Meryl sugiere y aislar la colonia, volver a aislarse para asegurarse y que tiene una E. coli solitaria (lo más probable) de su caca. Por supuesto, ejecute otras pruebas para asegurarse de que lo tiene aislado, por ejemplo, usando una prueba de anticuerpos.

En el segundo caso, sugiero comprar una cepa conocida de ATCC y hacer su trabajo en eso.

No, si quieres un cultivo puro de E. coli, hay otras enterobacterias en el intestino. Las culturas comerciales certifican que solo hay un tipo de bacteria. Usar el agua del inodoro o las heces en un agar común causará el crecimiento de lotes (¡muchas!) De bacterias, también necesitará realizar pruebas para separar los enterobacteres de cualquier otro tipo de bacteria y un agar EMB para identificar cuál es el E.coli del resto de enterobacterios. Las colonias de E. coli crecen de color verde metálico. Si quiere estar seguro de lo que está creciendo en el plato, use una bacteria cultivada comercialmente. también es más barato y más fácil que administrar mucha cultura y prueba de medios.

Existen formulaciones de medios diseñadas para ser selectivas para E. coli. Estos incluyen agar Macconkie o agar Brilliant Green. Estos pueden comprarse de fuentes comerciales y generalmente ~ 90% de las colonias bacterianas que crecen en estos serán E. coli. Funcionan teniendo antisépticos que seleccionan Gram positivos y un indicador que diferencia las bacterias que pueden fermentar la lactosa (como E. coli).