¿Existe alguna alternativa más económica que el uso de la proteinasa K en la extracción de ADN de tejidos o bacterias animales?

Cualquier método que no use proteinasa K probablemente se base en la extracción de fenol-cloroformo. Si le preocupa el costo de la proteinasa K (que, honestamente, es una de las enzimas más baratas disponibles en el mercado que puedo imaginar – ¡$ 70 le da 2 mililitros de NEB!), Probablemente esté haciendo algo de biología del bricolaje (aunque yo no puede decir porque es inexplicablemente anónimo!) y realmente no desea manejar o tratar de deshacerse de fenol.

Las extracciones de fenol-cloroformo son un método de la vieja escuela para eliminar todas las proteínas de una solución acuosa. Esencialmente, se mezcla un volumen igual de 50:50 de fenol: cloroformo con la muestra, se mezcla vigorosamente y se centrifuga para separar las fases. La proteína termina en el fenol (un solvente orgánico), el ADN termina en la fase acuosa.

El fenol es increíblemente tóxico para los humanos simplemente porque muchas de las moléculas de las que estamos hechos se desarrollan y se disuelven fácilmente en fenol. Penetra en la piel, deja quemaduras increíblemente desagradables (conseguí una gota en mi brazo una vez y tuve un verdugón de casi una pulgada durante casi dos semanas después), y requiere arreglos especiales de manejo y eliminación, lo que lo hace completamente inadecuado para el bricolaje laboratorios.

¿Qué se puede obtener que digiera las membranas celulares tan bien como la proteinasa K?

¡Usted puede ir al viejo jabón de plato en el método de materia vegetal!

Hablando en serio.

Evaluación de cinco métodos para la extracción total de ADN de escarabajos del gusano de la raíz del maíz occidental

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