La mayoría de las fuentes dicen que debería almacenar mis pinchazos de agar a 4 grados Celsius. Sin embargo, ¿está bien si guardo mis pinchazos de agar a 2 grados Celsius?

El agua comienza a congelarse a 4 grados Celsius, no a 0 grados como se establece comúnmente. Cuando el agua comienza a congelarse, se desarrolla una red cristalina donde las moléculas de agua polarizadas se alinean como un cristal (sólido) basado en las fuerzas intramoleculares principalmente de la unión de hidrógeno.

Esta característica del agua es lo que hace que el agua sea menos densa como un sólido que como un líquido. Es lo que hace que el hielo flote y explica por qué los lagos no se congelan sólidos de abajo hacia arriba (congelando y matando a toda la fauna debajo del hielo).

El agar o agarosa es un medio de cultivo basado en carbohidratos y también se usa para la electroforesis en gel. La preparación implica disolver completamente la agarosa en agua muy caliente. Esto se hace porque la agarosa se solidifica lentamente a partir del estado líquido, formando una red reticular dispuesta más o menos homogéneamente.

Si el agua se congelara, el gel no mantendría su integridad estructural microscópica. Al igual que el agua que se encuentra dentro de las grietas de las rocas, la expansión de agua menos densa creará una presión dirigida hacia el exterior que romperá la integridad de los materiales que lo rodean.

Probablemente, cuatro grados es la configuración recomendada porque el punto habitual donde el agua pura comienza a congelarse se desplaza hacia abajo (más frío) cuando el agua contiene sal o electrolitos. Ese es el principio involucrado en hacer helado desde el principio.

No habría ninguna razón para ir a lo seguro y recomendar, por ejemplo, 6 grados, porque no es agua pura y no comenzará a congelarse a los 4 grados habituales, pero más fría que eso. Creo que es una “mejor práctica” no ir por debajo de 4 grados C porque las concentraciones de agar en el agua variarán de acuerdo con el uso particular de agar

La integridad estructural del enrejado o malla similar a la red no se pudo mantener como cuando se hirvió originalmente y se dejó fraguar.

En términos de electroforesis con agarosa, generalmente es mejor formar el gel y hacerlo funcionar el mismo día.

ICE podría convertirse en un problema. Los ciclos de congelación y descongelación son dañinos para muchas células. Pasar demasiado cerca de cero como una temperatura promedio tiene ese peligro de deslizarse por debajo y por encima. Si es ese tipo de refrigerador, no mantenga los cultivos cerca del compartimento del congelador. Depende, por supuesto, de las bacterias particulares. Muchos trabajadores han mantenido puñaladas de E. coli a temperatura ambiente durante décadas.

Es mejor no hacerlo La razón por la que se supone que debes almacenar las pinzas de agar a 4 celsius es porque es la más fría que puedes obtener con agua pura antes de que comience a congelarse. Ahora, el agar está lejos del agua pura y por lo tanto su punto de congelación se reducirá significativamente, por lo que probablemente no se congele si la temperatura es un poco baja, pero tener que almacenarlo a una temperatura básicamente la más fría que puede garantizar que ganó La formación de cristales de hielo en el medio es una buena práctica y el motivo de la directriz de 4 grados centígrados.

La mayoría de las unidades de refrigeración hacen un trabajo bastante bueno de regulación de la temperatura, pero todas pasan por ciclos. Muchos fabricantes se enfocan en un rango de 2 a 8C con un objetivo de 4C (que se puede configurar, pero generalmente en la entrega que es el rango preestablecido).

No debería haber un problema si el objetivo se establece en 2C a menos que el cultivo sea más sensible a la temperatura que la mayoría.

Entonces, personalmente, no me preocuparía la diferencia.

Depende de la estabilidad y la sensibilidad de la regulación de temperatura del sistema de enfriamiento. Si un exceso de ciclo de enfriamiento debe alcanzar cero grados C o menos, las características estructurales de los medios pueden verse comprometidas. El daño probablemente no será uniforme, sino que dependerá de la ubicación de los medios en el enfriador.

El agua es más pesada a 4 ° C .. pero por debajo de 4. Las moléculas comienzan a organizarse para formar estructuras cristalinas, convirtiéndola así en hielo. Así, después … el deshielo puede marcar la diferencia.